
歐洲(zhōu)實驗(yàn)動物科學協會聯合會在科研和教學中使用農場動物的健康管理建議(下)
續(xù)接上文:《歐洲實驗動物科學協會聯合會在科研(yán)和教(jiāo)學中使用農場動物的健康管理建議(上)》
(b):病原體篩查
由於農場環境及操作(zuò)的開放性,病毒、細菌、真菌、體內和體(tǐ)外(wài)寄生蟲都可能出現在(zài)農場環(huán)境中,不(bú)可能(néng)完全阻止這些生物的入(rù)侵(qīn)。研究人員(yuán)必須(xū)考慮要求動物(wù)排除哪些傳染性病原(yuán)體的感染。如上所述,任何(hé)有臨(lín)床疾病症狀史(shǐ)的動物都不會被用於研究,因此(cǐ)所(suǒ)有(yǒu)的個體篩查都將確保動物不存在亞臨(lín)床感(gǎn)染/疾病。因為(wéi)所有的感染,無論是臨床的(de)還是亞臨床的,都會導致動物生理學(xué)變(biàn)化。此外,正常的微生物菌群及其變化可能會影響(xiǎng)動物模型的表型。因此,農場應告知動物管理的各個(gè)方麵,以及(jí)可能影響菌(jun1)群變化的操作(例如飲食和用藥)。然而,必須(xū)對畜群中出現(xiàn)的任何感染性疾(jí)病進行徹底調查,包(bāo)括進行實驗室檢測。必須排除損害動物健康、影響實驗研究以及(jí)人畜共患的病原(yuán)體。
應與時俱進(jìn),選擇合適(shì)的篩查方法和實驗室診斷方(fāng)法。根據病原(yuán)體的特點和篩查目的(de),製定合適的篩查周期和采樣數量。在(zài)某(mǒu)些情況下,可能需要對一(yī)整群動物進行單獨和重複采樣,例如向一個已經建立並明確病原體狀況的(de)種群中,引入新批次動物。在(zài)其他情況下(xià),可提前製(zhì)定采樣頻率,針對特定的動(dòng)物和數量進行定期采樣,例如一個封閉穩(wěn)定的種(zhǒng)群中,沒有出(chū)現(xiàn)可疑症狀或汙染,定期進行的病原體篩查。
並僅限於具有代表(biǎo)性的(de)樣(yàng)本(běn),例如在不懷(huái)疑感染或汙染(rǎn)的情況(kuàng)下(xià),在穩定的封閉(bì)種群中進(jìn)行(háng)例行/定(dìng)期健(jiàn)康檢查。在製定動物健康管理方案時進行風(fēng)險評(píng)估是非常重要的。
必須製定書麵的動(dòng)物健康管理方案,包括方案細節描述,列出需要篩查的病原體清單,需要檢測的動物(wù)數量以及陽性結果,在(zài)過去18個月中(zhōng)的曆史(shǐ)檢測結(jié)果以及針對陽性病原體采取(qǔ)的措(cuò)施,病原體檢測(cè)的方法,病原體檢測的實驗室名稱等。
(c):妊娠狀態檢查
對於使用懷孕動物的(de)研究,應提供(gòng)有關動物來(lái)源(yuán)的適當細節(來源於外部繁殖動物或內部配種)。
此外(wài),在妊娠的最後三分之一期間暴露於實驗產生的不良反應意味著胎兒(ér)也受到操作的影響,因此在Directive 2010/63/EU(歐盟(méng)保護實驗動物新指令)第1條第3段(a)(ii)中有明確說明。在歐盟(méng),禁止在臨近動物預產期時(shí)進行運輸操作。在實(shí)驗使用前(qián)運輸時,需要提供動物繁(fán)殖條(tiáo)件和胎齡,以及(jí)關於產仔數的詳(xiáng)細信息,這是很重要的。
雖然沒(méi)有明確(què)禁止,但應該避免運(yùn)送懷(huái)孕非常早期的雌性動(dòng)物。應保障胚胎安全著床,以(yǐ)避免妊娠早期有價值胎兒被再吸收。繁育對實驗結果有很大影響,特(tè)別是對依賴於內分泌因素的(de)生理狀態研究以及人道(dào)終(zhōng)點的判定(dìng)。供應商和用戶之間的良好溝通是必(bì)不可少的。妊娠/不育狀態可根據胎齡使用各種方法進行診斷,包括血(xuè)液檢測孕酮(母豬)和妊娠(shēn)相關(guān)糖蛋白(反芻動物),直腸觸診(母豬和奶牛)和超聲檢(jiǎn)查(母豬和反芻動物)。
建立從供應(yīng)商到用戶的運輸
豬和反芻動物(wù)的運輸應符合相關法律,並考慮到動物福利、人(rén)身安全和生物安全等因(yīn)素(sù)。如果衛生和健康狀況相同,最好選擇(zé)盡可能(néng)靠近(jìn)動物使用者的供應商,以減少運輸導致的應激。如果涉及進口動物采購,必須遵守出口國、過境國和進口國的(de)現行(háng)法規。應考慮所(suǒ)有這些國家的公共假(jiǎ)日,以避免運輸過程不可預見(jiàn)的中斷或延(yán)誤。
動物使用機構
適(shì)用於供應商(shāng)的運行狀況管理策略也適用(yòng)於動物(wù)使用機構。當動物到(dào)達使用設施時,應采取(qǔ)措施維持或提高標準,以保障動物福利和實驗進展。
在實驗設施中飼養農場動(dòng)物是(shì)一項(xiàng)巨大的挑戰,因為必須考慮以下方麵:
將來自不同產地的農(nóng)場的動物(wù)分開,並確保采取適當的檢疫程序;
區分不(bú)同種類、性別及年(nián)齡;
符合飼養反(fǎn)芻(chú)動物和豬(zhū)的法律要求。
當將農業動物用於研究目的時,適用的法規和標準是Directive 2010/63/EU和ETS 123,即使動物來自農業(yè)環境,在農場時是適用農場動物的相關法規。如果可以證明研(yán)究的目的(de)需要在農業條件下進行(háng),出於科學原(yuán)因,可以適用農業標準。最後(hòu),除了這些適用於農場動物福利的歐洲法規和(hé)標準外,FASS《研(yán)究和教學中農業動物的護理和使用指南》提供了有趣的建議。
農場動物的住所(suǒ)應該允許它(tā)們的(de)“自然行為(wéi),特別是需要放牧或覓食、鍛煉和社(shè)交(jiāo)”。相容動物的(de)群(qún)養非常重要,因為它們(men)是群居動物,有與同種(zhǒng)動物互動的強烈動機。
足部護理管理、寄(jì)生蟲控製(zhì)措施(考慮抗寄生蟲治療的潛在耐藥性)、定期審查生產指標和BCS評分非常必要。所有(yǒu)操作和發現都應記錄在案,並應創建一(yī)個設(shè)施數據庫並持續更新,以供進一步參考或評估。
實驗飼養家豬(zhū)和反芻動物作為人類疾(jí)病模型,必須為每一項研究製(zhì)定一個基本(běn)的標(biāo)準監測(cè)方案和防(fáng)護要求。根據具體的研究領域和研究環境,建立更加個性化的健康和福利評估和管(guǎn)理方(fāng)法尤為重要。應考慮采取適當措施確(què)保動物的福利(良(liáng)好的身心健康)(環境豐富,其中與其他動物和工作(zuò)人員的積極互動非常重要)。
必(bì)須(xū)在交叉感染風險評估的基礎上製定防護要求,範(fàn)圍可(kě)以從僅更(gèng)換衣服、戴口罩和/或(huò)穿鞋套或特殊空氣過濾器係統(如高(gāo)效過濾器),並根據需要結合氣壓差。根據德國、瑞士和奧地利的數據,在大多數研究機構中,防護要求隻包括更換衣服和佩戴口罩和鞋(xié)套。
衛生和飼養操作應基(jī)於風險評估,並應與所進行的實驗類型及其生物安全(quán)水平成比例。所有表麵應能夠合理去(qù)除汙染,同時對動物和設施人員是安(ān)全的。此外(wài),應避(bì)免廢物處理造成的交叉汙染。
適應和隔離檢疫:
1)適應期
運輸(shū)過程給(gěi)動(dòng)物帶來了應激,擾亂了它們的正常環境。適應期的目的是(shì)讓(ràng)動(dòng)物從運輸的應激中恢(huī)複(fù)過來,並適應新的環(huán)境(飼養室和籠具、群養同伴、飲水係統和食物、工作人員等)。在此期間,應盡一切努力盡量減少新環境的影響(xiǎng),最初應保留(liú)相同的群養同伴(bàn)、墊料(liào)或食(shí)物,並逐步更換墊料。適應期的長(zhǎng)短(從動物到達機構直到被使用)取決於各種因素,如動物的年齡、運輸的類型和(hé)持續時間、地理因素(如氣候、海(hǎi)拔)、研究的類型(急性或慢性項(xiàng)目)以及研究所需的(de)動物年齡(如斷奶(nǎi)後的仔豬)。另一個決定適應期(qī)的重要因素是動物必須(xū)與(yǔ)飼養管理人員建立(lì)信任和信心的關(guān)係。動物的適應(yīng)過程應(yīng)在實驗使(shǐ)用前完(wán)成。
2)檢(jiǎn)疫
檢(jiǎn)疫(yì)要求隔離(lí)等待健康評估結果(guǒ)的動物群體,主要是為了保護已經在(zài)設施中的動物的健(jiàn)康。如果一個設施一次隻接收一批動物(來自同一供應商的年齡相近的動物),並采取(qǔ)全進/全出的措施,那麽這些動物可以在同一個飼養室進行檢疫和(hé)實驗操作。同樣,如果有多個可以適(shì)當(dāng)隔離的飼養室,則可以(yǐ)使用飼養室(shì)進行(háng)檢疫以及(jí)實驗操作,避免再次轉移動物對動(dòng)物(wù)造成應激。可以通過各種體檢和操作進(jìn)行檢(jiǎn)疫,達到檢疫效果(guǒ)。檢疫(yì)應(yīng)能夠確保動物在到(dào)達使用者設施後,能夠暴露出亞臨(lín)床疾病,以避免動物(wù)質量影響研究有效性。
在檢(jiǎn)疫期間,通過臨床檢查(個體臨床評分記錄表)以及實(shí)驗室檢測(診(zhěn)斷測試),監控(kòng)動物健(jiàn)康,以評估是(shì)否可以進入實驗使用階段。檢疫期長短取決於對動物進行監測和篩選的病原體的潛伏期。潛伏期的長短可能構(gòu)成重大挑戰(zhàn)。因此,在供應商農場實施強有力(lì)的健康監測方案,是非常重要的。在檢疫期結束時(shí),使(shǐ)用設施根據排除清單上的疾病病原(yuán)體,剔除檢測(cè)呈陽性的動物(可以考慮治療的某些特定情況除外,例如某些類型的寄生(shēng)蟲感(gǎn)染)。在決定將陽性(xìng)動(dòng)物安樂死之(zhī)前,應盡量嚐試將動物(wù)送回供應商,或安(ān)排其他合理處置(zhì)措施。處置動物(wù)屍體的方式應避免傳(chuán)播病原體(tǐ),並符(fú)合國家法律法規。經過判斷(視疾病潛伏期而定),可以(yǐ)適當延長檢疫(yì)期。如(rú)果動物意外死亡(wáng),診斷性屍檢非常重要,並能夠提供大量信息。
人員(yuán):
一個經驗豐富且能力強的主獸醫,對於設施管理是非常重要的。所有設施內工作人員,都應該對設施管理以及涉及(jí)的物(wù)種有足夠的知識背景以及認識程度,應能夠識別疾病的臨床症狀、痛苦和疼痛、評估緊急情況。主獸醫應積極主導設施內工作人員的培訓,並定期複訓(xùn)。與動物健康(kāng)相關的問題,人員應立即報告給主治獸醫以便及時診治(zhì)。主治(zhì)獸醫和(hé)動物設施管理員都有責任及時解決(jué)所報告的問題。研究人員、動物設施人員和(hé)主治獸醫之間定期、頻繁的互動和(hé)良好、清(qīng)晰的溝通對於設施的(de)良(liáng)好運作非(fēi)常重要。所(suǒ)有人員都應了解並遵守設施防護操(cāo)作的必要性,能夠(gòu)正確使用適當的PPEs。
健康監控體係:
健康監控體係在很大程度上取決於所進行研究的類型及其持續時間(急性或慢性研(yán)究(jiū)),在(zài)製定時,應綜合考慮供應商設施的健康監控體係。
1)風險評估
評估通過無生命媒介(材(cái)料)或活媒介(害蟲、其他動物、人類)引入病原體的風險非(fēi)常重要,並為這些風險製定控製措施。例如:
與(yǔ)風險相對應(yīng)的,適當的設施工程控製措施(氣壓等級、空氣過濾、清(qīng)潔和消(xiāo)毒設施和設備、進出設施的操作、人員PPEs的要求等)。
任何時候都應備有人員PPEs。
家中有同種類動物的員工應采取特別的預防(fáng)措施(shī)(衛生-淋浴,指定工(gōng)作服等)。
應製定明確的外來人員參觀政策。衛生和檢疫規則應事先溝通,並應保留(liú)書(shū)麵記錄(lù)(所有訪客已理解(jiě)並遵守設施(shī)規則的簽名(míng)文件、訪客簿或(huò)類(lèi)似文件等)。對進(jìn)出(chū)設(shè)施的人員和車輛進行登記。
2)對動物的監控(kòng)
應(yīng)定期對(duì)動物進行(háng)臨床健康檢查(使(shǐ)用個體臨床記分表)。
應進行定期篩(shāi)查,以確保(bǎo)納入研究的動物不受有害病原體的影響(仍符合納入和排除標準)。對患病動物或意外死亡動物的診斷也能夠為健(jiàn)康監控體係提供信息。
如(rú)果研究(jiū)結束時要將動物安樂死,則應安排屍檢。並記錄(lù)相關的大體病變(biàn)和出具組織病理學結果(guǒ)報告。診斷操作可能需(xū)要額外的檢測。
3)應急計劃
應製定預案,以備可能出現的非預期的病原體陽性(xìng)檢(jiǎn)測結果。具體取決於病(bìng)原體陽性結果對人和動物的影(yǐng)響(人畜共患病)、對研究的影響、對設施(應報告疾(jí)病爆發)的影響。
應製定(dìng)災難(nán)應對計劃,如果設施發生(shēng)物理損壞,需要將動物轉移到其他場所。
參考(kǎo)文獻:
Federation of European Laboratory Animal Science Associations recommendations of best practices for the health management of ruminants and pigs used for scientific and educational purposes Laboratory Animals 2021, Vol. 55(2) 117–128 ! The Author(s) 2020