目 的

靈長類獸醫協會（APV，Association of Primate Veterinarians）意識到在（zài）非人類靈長類動物（NHP，Non-human primate）中，腦脊液（CSF，Cerebro-Spinal Fluid）的采集可能對於（yú）臨床和生物醫學研究都是必（bì）需的。由於這項技術存在固有風險，實驗動物獸醫應確定腦脊液采集（jí）對臨（lín）床評估的必要性和實用性。為（wéi）了生（shēng）物醫學研究目的而進行腦脊液采集（jí）須在動物護理和使用（yòng）委員會（IACUC，Institutional Animal Care and Use Committee）或等（děng）同的監管機構批準下進行。以下建議為IACUC、使用（yòng）非人類靈長類動物模型（xíng）的研究人員（yuán）以及獸醫人員提供基（jī）本（běn）信息，以供在製定腦脊液（yè）采集相關的政策（cè）和標準操作程序（SOP，Standard Operating Procedure）時予以考慮（lǜ）。

背 景

腦脊液分析是一種強大的工具，可加強對中樞（shū）神經係（xì）統內（nèi）發生的各種過程的檢測，例如（rú）：出血、炎症、感染、腫瘤和（hé）其他臨床情況。此外，對腦脊（jǐ）液中化合物（如激素、藥物、神經遞質、生物標誌物、代謝產物和病毒）進行係（xì）列評估，在基礎研究和轉化研究中同樣非常重要。中（zhōng）樞神經係統中的（de）腦脊液體積可通過腦脊液的分泌和吸（xī）收而維持穩定。

操作注意事項

腦脊液通常通過（guò）腦池或（huò）腰椎間隙穿刺采集。其中，通過腰椎穿刺采集（jí）腦脊（jǐ）液的並發症風險相（xiàng）對（duì）較低。因為在大多數非人（rén）類靈長類動物中，腰椎穿刺位點遠離（lí）脊髓的末（mò）端。應適當麻醉動物，並（bìng）使用（yòng）無菌技術進行操作，包括剃毛等術部準備和無菌材料的使用。至少（shǎo）需使用無菌手套、注（zhù）射器和針頭，還可考慮使用無（wú）菌手術創巾。腦脊液采集通（tōng）常以側（cè）臥位、胸骨臥位或坐位（wèi）進行，分別通過頸部或脊柱的屈曲來改善對腦池的進入或擴（kuò）大椎間隙（Gereschlager，1987；Magden，2015；Wolf，2012）。選擇的針頭尺寸和長度應適合非人類靈長類動物的（de）種屬和體型（Brady，2000；Cereschlager，1987；Magden，2015；Wolf，2012）。操作時（shí）使用的技術、設備和耗材，以及圍手術期的護理因動物種屬、研究目的（de）和臨床獸醫的偏好而不同。

有些（xiē）研究（jiū）方案可能需隨（suí）時間推移而連續采集腦脊液，或需采集未麻醉的受試對象（xiàng）的腦脊液樣本。對於這些方案，可通過長期植入的腦脊液穿刺導管從清醒狀態的恒河猴身上連續采集腦脊液，而該導管可連接至皮下的采集接入口（Gilberto，2003；Gilberto，2022；MacAllister， 2016）。

在編寫本文件時，作（zuò）者盡一切努力尋（xún）找總腦脊液體積的數值、硬腦膜穿刺的次數限（xiàn）製或（huò）建（jiàn）議、采集頻率、安全的抽取體積以及腦脊液補充速率相關的最新參考文獻。對於大多數靈長類動物，這方麵的文獻很有限。此外，采集方法也各（gè）不相同，因為從靈長類獸（shòu）醫協會成員收集（jí）的調查結果表明，各機構均可（kě）成功地使用多種不同的方法采集腦脊液。因此，作者根（gēn）據現有的（de）最佳證據提供了（le）腦脊液采集的考慮因素和（hé）建議。

作（zuò）為參（cān）考，先前的研究已確定成年雄性恒河猴（8.0-10.6kg）的表觀腦脊液體積為10+/-0.06 mL，腦脊液流速為0.018+/-0.003 mL/min（McCully，2020）。恒河猴的腦脊液形成速率範圍為28.6-44.2 μL/min（Curran，1970；Lux，1975；Martins，1977）。在這方麵需要對非人靈長類動（dòng）物進行進一步的研究，以促進更具（jù）指導性建議的製定。

潛在不良反應

雖然在非人類靈長類動物中進行腦（nǎo）脊液采集時報道的並發症很少，但解剖變異以（yǐ）及不適當或技術不（bú）佳的操（cāo）作（zuò）方法可（kě）能導致樣本受損或並發症，如出血，腦（nǎo）疝，感染，腦幹、脊髓或神（shén）經根損傷以及動（dòng）物（wù）的（de）不適。這些並（bìng）發症雖然罕見，但可能會損害動物福利。

由於（yú）存在風險，應由獸醫或經過（guò）培訓的獸醫人員采集腦脊液。對於（yú）未成功的（de）腦脊液采集嚐（cháng）試，實踐（jiàn）可能有所不同。常見做法是允許一個人進行最多三次未成功的嚐試。在第三次嚐試失敗後，應由另一位合（hé）格的人員接替。如果第二個人（rén）在三次（cì）嚐（cháng）試後（hòu）仍無（wú）法采集到腦脊液，則停止嚐試。同時動物將接受適當的鎮痛治療，並從麻醉中恢複（fù）。在嚐試失敗後更換采集部位（例如從腦池到腰椎）通常可成（chéng）功。如果是（shì）未進行成像的失敗嚐試，則可（kě）使用X線透視輔助穿（chuān）刺針放置。除提高成（chéng）功率外，影像引導還可降低創傷（shāng）性穿刺的發生（shēng）率。（Eskey，2001）

術後監測（cè）應持續進行（háng），直到動物返回其籠內，並能（néng）在沒有支撐的情（qíng）況下保持直立姿勢（shì）。對動物的監測（cè）應該（gāi）至少持續24小時或根據IACUC批（pī）準的方案進行（háng）。監測應包括（kuò）對基本的生理、行為和運動（dòng）參數的評估（gū）。尤（yóu）其應評估動物是否出（chū）現（xiàn）神經功能障礙的跡象，包括（kuò）但不限於嗜睡、抑鬱、昏迷（mí）和頭部壓迫感等（děng）。在人類醫學中，腦（nǎo）脊液采集後（hòu）出現的頭（tóu）痛和由此引起的顱（lú）內低壓並不少見。考慮到非人類靈長類動物中的這（zhè）種潛在後遺症，應在手術時給予鎮痛治療，並（bìng）延長2-3天，或根據與（yǔ）頭（tóu）痛（tòng）或脊柱（zhù）疼痛相關行為的術後（hòu）觀察結果按需提供（gòng）鎮（zhèn）痛治療（liáo）。最有效的鎮痛方案可能是術前即開始綜合治療。

IACUC注意事項和記錄保存

IACUC應了解腦脊液采集的相（xiàng）關工作以及所有可能的並發症，並至少每年對其審查。所有相關信息（xī），如藥物劑量、術前準（zhǔn）備、采集的腦脊液體（tǐ）積、采集頻率（lǜ）以及術後短（duǎn）期和長期恢複情況，均應在IACUC方（fāng）案中進行描述，並在醫療記錄或實驗（yàn）室日誌中適當地記錄。

腦脊液可能是研究方案中的關鍵（jiàn）資料，但如果采集技術不（bú）恰當，可能會對動物福利產生影響。遞交方案時，應提供（gòng）采集次數和頻率的科（kē）學依據。具體而言（yán），IACUC還應（yīng）仔細評估涉及腦脊液采集的每個提案，並考慮（lǜ）以下問題：

1.腦脊液采集是否對實（shí）現方（fāng）案中所述的科學目標至（zhì）關重（chóng）要？

2.是否有替代（dài）方法和侵入性較小的中樞神經係統評價方法（如成像技術）可供選擇，如果有，是否考慮（lǜ）過？

3.操作人員是否接受過適當的培訓並具備足夠的（de）技能？

4.是否將提（tí）供適當的圍（wéi）手術期麻醉和鎮痛（tòng）方案？有關麻醉和鎮痛計劃，應谘詢實驗動物獸醫。

5.采集的（de）腦脊液體積是否符合動物的年齡和體型考慮？

6.腦膜穿刺的（de）次數和頻率是（shì）否適合動物，以及並發（fā）症風險（xiǎn）是否已（yǐ）降到最低？如果多次采集腦脊液為研（yán）究的一（yī）部分，應明確規定每隻動物的最大采集次數。

7.術後監測計劃是否適當？

8.是（shì）否考慮了所有可能的術後並發（fā）症，並（bìng）列出了所有合理的幹預方法，包括安（ān）樂死？

原文（wén）：

Association of Primate Veterinarian :Guidelines for Cerebrospinal Fluid Aspiration for Nonhuman Primates in Biomedical Research.