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 來源:實驗動物那些事(shì)兒 日期:2024.05.28 

齧齒類動物血常規結果分析注意事項

血液學檢(jiǎn)查是動物疾病狀態評估、術前檢查和常規體(tǐ)檢中(zhōng)必不可少的內容。評估血常規檢測報(bào)告的可(kě)靠性並解讀其(qí)結果(guǒ)是獸(shòu)醫朋友們的工作日常。本文就(jiù)血液學檢查的(de)一些要點進行分析探討。

采血是進行血常規(guī)檢查的第一步,本公眾號(hào)曾經發表《獸醫隨筆:實驗動物采血指南》一文,介紹采血量(liàng)和采血點的一般指導意(yì)見。

進行血液學分析時通常建議用EDTA抗凝管采集樣本,但采集時應(yīng)該注意抗凝劑和血液的比例。樣本質量會顯著影響檢測結果,常見的樣本質量問題有:

抗凝效果不佳(jiā)導致出現血凝塊,會使血小(xiǎo)板(PLT),白細胞(WBC),紅細(xì)胞(RBC),紅細胞(bāo)壓積(HCT)假性降低;

溶血會使RBC、HCT假性降低的同時平均紅(hóng)細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、平均紅細胞血紅蛋白(MCH)假性(xìng)升高(gāo);

乳糜血會(huì)使血紅蛋白(Hb)、MCHC、MCH假性升高;

樣本不(bú)新鮮會使紅細胞形態(tài)發生(shēng)改變導致MCV和HCT假性升高,MCHC假性降低,同時白細(xì)胞形態也會(huì)發生改變(biàn)。

紅細(xì)胞、白細胞(bāo)和血小板是血常(cháng)規報告中需(xū)要解讀(dú)的三個方麵。

紅細胞

相比於人及其他哺(bǔ)乳類動物,齧齒類動物的紅細胞自有其(qí)特征。倉(cāng)鼠的(de)RBC約6.0微(wēi)米,豚鼠的約7.8微米。大鼠出生(shēng)時紅細胞較大(10.03 μm),但在出生後30天內變到小於6μm。小鼠RBC大小約4-7μm,隨(suí)年齡增長而增加。多色性是(shì)齧齒類動物血象的一個常見特征。在豚鼠血塗(tú)片上(shàng)還可見紅細胞疊連。特(tè)定疾病模型小鼠中,如(rú)β地中海貧血模型小鼠RBC可觀察到異常形態,例如靶形紅(hóng)細胞、棘形狀紅細胞、淚滴狀紅(hóng)細(xì)胞、破碎狀紅細胞、有核(hé)紅細胞(bāo)等。

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(圖(tú)片來源:https://www.researchgate.net/publication/233535082)

和大多數哺乳動物(包括人)不同(tóng)的是,新生齧齒類動物(小鼠、大(dà)鼠、豚鼠、沙鼠)的血(xuè)紅蛋白和血細胞比容(róng)值低於成(chéng)年動物;新出(chū)生大鼠(shǔ)有16%的網織紅細胞,成年後則(zé)減少至2.5%;據報道,大鼠、沙鼠(shǔ)的RBC計數存在性(xìng)別差異,雌性的計數通常比雄性高。不同品係的小鼠和大鼠,血紅蛋白值(zhí)也會有(yǒu)很(hěn)大的差(chà)異。

樣本采集(jí)部位或麻(má)醉的影響(xiǎng)會導致血常(cháng)規數據的變化。例如,從大鼠尾部(bù)采集的樣本中的血紅蛋白和紅細胞比容比從腹主動脈或心髒中采集的樣本中要高。豚鼠中(zhōng)已經(jīng)證實RBC值可能由於麻醉期間發生脾內紅細(xì)胞扣留而降(jiàng)低。

影響RBC參數(shù)的非致病性條件還包括(kuò)妊娠、季節變化等。在大鼠中,紅細胞比容在(zài)妊娠期間減少。在倉鼠中,RBC計數、血紅蛋白濃度和紅細胞比容在冬眠期間升高,這(zhè)是因為在冬眠(mián)期(qī)間,倉鼠基(jī)礎代(dài)謝率降低,RBC壽命延(yán)長了。

紅細胞和貧血

紅細胞指標重點(diǎn)關注(zhù)RBC、HCT和Hb,它們的變化可以提示動物貧血或紅細胞增多。

齧齒類動(dòng)物中並沒有原(yuán)發性的紅細胞增多症,但可能見(jiàn)於輕度脫(tuō)水(shuǐ)的動物。貧血則(zé)較(jiào)為常見。初(chū)步判斷為貧血後,還需要關注平均紅細胞體積(MCV),MCH和MCHC,可用於輔助判斷貧血類型,這三項都偏低常見於缺鐵性貧血,而(ér)高於正常範圍多(duō)見於(yú)葉酸或維生素B12缺(quē)乏引起的貧血。網織紅細胞(bāo)是尚(shàng)未完全成熟的紅細胞,是反映骨髓(suǐ)造血功能的重要指(zhǐ)標。當其升(shēng)高時,提示骨髓造(zào)血功能(néng)旺盛,可能有溶血性貧血、缺鐵性貧血等;而當其降低(dī)時(shí),可能有再生障礙性貧血、急性白血病等。

儀器分析(xī)的(de)血常規化驗單隻能給出各種細胞的數量,但並不能給出細胞形(xíng)態的異常描述。因此為了更準確分析(xī)血液學檢查結果還建議對血樣塗片進行形態學檢查。

RBC形態學(xué)可區分貧血的原因(yīn):出(chū)血、溶(róng)血、缺鐵、非再生性貧血、骨髓疾病(bìng)或淋巴細胞增生性疾病(白血病)等。

如果診斷為溶(róng)血性貧血,則需要(yào)在血塗片中尋找(zhǎo)血液寄生蟲的證據,如球狀附紅(hóng)細胞體和鼠血巴爾通體可能(néng)導致小鼠或大鼠貧血(xuè)。如果出現小紅細胞增多症、血色素減少、總蛋白低(dī)、血小板(bǎn)增多和(hé)網織紅細胞計數升(shēng)高則提示(shì)有慢性失血,建議檢查體表寄生蟲,在虱子嚴重感染的豚鼠(shǔ)和大鼠中可見這種現象。

白細胞

白(bái)細胞是機體抵禦感染、調控炎症、免疫和造血的關鍵。

齧齒類動物(wù)的白細胞形態和其(qí)他哺乳動物相似,但又有一定區別,齧齒類(lèi)動物的粒細胞被稱為嗜異性或假嗜酸性粒細胞,因為它含有紅色顆粒,與嗜酸性粒細(xì)胞相似。豚鼠(shǔ)有獨特的Foa-Kurloff細胞(bāo)(一種T淋巴細胞),含有一個大的細胞質包涵體。齧齒類動物的白細胞類型與(yǔ)其他(tā)哺(bǔ)乳動(dòng)物(wù)相似(sì),但淋巴細胞數量遠超過粒細胞:淋巴細(xì)胞約占86%,中(zhōng)性粒細胞約占10% ~ 25%,單核細胞約占6%,嗜酸性粒細胞約(yuē)占1% ~ 4%,嗜堿性粒細胞(bāo)很少。

WBC計數每天都會發(fā)生波動,因此采集樣本的位置和時間不同,結果也可(kě)能不同(tóng)。中(zhōng)性粒細胞(bāo)計(jì)數隨著大鼠(shǔ)年齡的(de)增長而增加,淋(lín)巴細胞計數隨著年齡的增長而減少。

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豚(tún)鼠的(de)Kurloff 細胞

(圖片來源:https://en.wikipedia.org/wiki/Kurloff_cell)

白細(xì)胞:淋巴細胞(bāo)

淋巴細胞增多

淋巴細胞分為T淋巴細胞和B淋巴細(xì)胞,大(dà)多在外周淋(lín)巴組織中生成並在血液和(hé)淋巴組織中循環。淋巴細(xì)胞的增多大多為生理性的。反應性(xìng)淋巴細胞增多的(de)原因包括(kuò)注(zhù)射疫苗後的短(duǎn)暫反應、長期免疫刺激、甲狀腺功能亢進等(děng);腎上腺皮(pí)質功能減退也會導致淋巴細胞增多,並常伴隨低血糖、電解質異常,出現高鉀低鈉和高鈣血症;淋巴瘤、胸腺瘤可見淋巴細胞(bāo)異常升(shēng)高,淋巴細胞性白血病則在淋巴細胞異常升高的同時伴有其他細胞係的(de)減少(shǎo)。

淋(lín)巴細(xì)胞減少

淋(lín)巴細胞減少最常見的原因是內外源(yuán)性皮質類固醇激素增多,導致其從(cóng)血液循(xún)環中轉(zhuǎn)移到淋巴組織中。在急性炎症反應、病毒(dú)感染以及發生內毒素血症和敗血(xuè)症時,也可見淋(lín)巴細胞減少。免(miǎn)疫缺陷病毒(dú)感染、免疫(yì)抑製藥物的使用也會讓淋巴細胞生成減少。淋巴回流(liú)受阻或丟失(shī)也會讓其計數減少。

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(A)淋巴細胞,特征是有(yǒu)深紫色圓形核;(B)單核細(xì)胞,特征是有腎(shèn)形細胞核;(C)中性粒(lì)細胞,特征為有(yǒu)紫色多小葉細胞(bāo)核。

(圖片來源:Bjorner & Zhu, 2019)

白細胞(bāo):中性(xìng)粒細胞

中性(xìng)粒細胞增多

與其他哺乳動物一樣,急性炎症反應(yīng)的特征是中性粒細胞增多並(bìng)有核左移。但並不是出現中性粒細胞增多就意味著急性(xìng)炎症反應,動(dòng)物經曆劇烈運動、驚嚇傷心等強烈情(qíng)緒後也可(kě)出現生理性中性粒細胞增多,但不會出現核左移。

應激或皮質類固醇也可(kě)導致動物出現中性粒細胞(bāo)數量增加,無左移。

此外慢性粒細胞性白血病、中性粒(lì)細胞功能障礙也可使中(zhōng)性粒細胞數量增加,同時出現核左移、多(duō)組織髓外生成粒細(xì)胞、血小(xiǎo)板減少等異常。

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正(zhèng)常情(qíng)況(kuàng)下,外周血液中性粒細胞以分葉核為主,胞核常分為2~5葉,杆狀核較少。中性杆狀核粒細胞增多或(和)出現晚幼粒細胞、中幼粒細胞,甚至原始/早幼粒細胞的現象,稱為核左移。

中性粒細胞減少

中性粒細胞減少也非常常見(jiàn),其中(zhōng)臨床常見的因素為嚴重(chóng)的細菌感染,例如肺炎、敗血症、腹膜炎等,常會(huì)伴隨核左移和中毒(dú)性變化。骨髓疾病、藥物毒性、病毒感染和腫瘤等也可造成中性粒細胞減少,同時可能會伴有紅細胞(bāo)和血小板的減少。

白細(xì)胞:嗜(shì)酸性粒細胞

嗜酸性粒細胞主要聚集在皮膚、消化道和(hé)呼吸道黏(nián)膜等疏(shū)鬆結締組織中,它的增多常見(jiàn)於寄生蟲感染的動物和發生I型超敏反應的動(dòng)物。也由於其分(fèn)布特點,大多血液寄生蟲不(bú)會(huì)引起嗜酸性粒細胞增多。此外,還有(yǒu)一些臨床原因可導(dǎo)致嗜酸性粒(lì)細胞增多,比如嗜(shì)酸(suān)性粒細胞性腸炎、嗜酸性(xìng)肌炎等炎症反應;某些能促(cù)進嗜酸性粒細胞生成和釋放(fàng)的(de)腫瘤(淋巴瘤、鱗狀(zhuàng)細胞癌(ái)等);腎(shèn)上腺皮質機能減(jiǎn)退等。

白細胞:嗜堿性粒細(xì)胞

嗜堿性粒細(xì)胞參與遲發性過敏和寄生蟲免疫(yì)反(fǎn)應,因(yīn)此嗜堿性粒細胞增多症(zhèng)常和嗜酸性粒細胞增多症同時發生。此外還可見於高脂血症、嗜堿(jiǎn)性粒細胞性白血病和骨髓增生性疾病。

白細胞:單核細胞

單核細胞等主要功能是吞噬作用、調(diào)節炎症(zhèng)反應、參(cān)與抗原提呈(chéng)、參與鐵的(de)調節。因此當機體出現急性或慢性炎症、組織壞死時,都(dōu)會(huì)導致單核細胞增多。中性粒細胞減少時也會出現單核細胞代償性增加。其他(tā)不常見的原因還(hái)包括應激或類固醇、單核細胞白血病等。齧齒類動物中,多達25%的F344大鼠會發生單核細胞性白血病。發病動物外周血中,可見非典型性單核細胞,白細胞計數(shù)極度增高和溶血性貧血。

血小板

血小板為骨(gǔ)髓巨核細胞胞漿裂(liè)解脫落的小塊胞質,其主要作(zuò)用是凝血和止血,修補破損血管(guǎn)。齧齒類(lèi)動(dòng)物的血小板數量和凝血過程與其他哺乳動物相(xiàng)似。在小鼠(shǔ)、大鼠或(huò)豚鼠中,未觀察到血小板(bǎn)計數的性別或品係差異。大鼠的血小板會聚集,計數往往不可靠。

血小板減少

血小板減少症(zhèng)發生時,動物可出現瘀斑、瘀點、黏(nián)膜(mó)出血、止血困難等。但血液分析儀判(pàn)讀(dú)為血(xuè)小板減(jiǎn)少(shǎo)時,應做(zuò)血塗片確認是否發生凝集,因為血小板做血液采集、運輸、儲存過程中會活化並(bìng)凝集進而影響機器讀取數據。通過無創性靜脈穿刺采血、使用檸檬酸鹽(yán)抗凝劑、減少采樣後儲存時間、避免(miǎn)低溫(wēn)等措施可以減少(shǎo)這種影響。

通(tōng)常血小板減少(shǎo)是一過性的,跟多種係統性疾病(bìng)都有關聯,隨著疾病的(de)康複,血小板計數也會恢複(fù)正常。持續性的或進行性的血小板(bǎn)減少症表明血小(xiǎo)板生成或(huò)消耗持續失(shī)衡。例如血小板減少伴隨白細胞(bāo)減少和(或)貧血通(tōng)常提示骨髓疾病(bìng)引(yǐn)起的造血功(gōng)能障礙;免疫介導的破壞等。

血小板增多

血小板計數增多可能由原發性(xìng)血小板增多症、骨髓增殖性疾病和繼發性血小板增多症引起。

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