血生化檢測

我們在前文《齧齒動物血生化項目分析（上）》中介紹了（le）齧齒動物的蛋白質（zhì）與肝膽功（gōng）能指（zhǐ）標以及腎髒功能指標的檢測意義。本文（wén）我們（men）將繼續對齧齒動物的（de）脂質代謝（xiè）、胰腺功能（néng）、糖代謝等相關常見血生化指標進行介紹。

脂代（dài）謝檢測

脂質的（de）運輸（shū）對機體內細胞功能、代謝等起著至關重要的作用（yòng），此外它（tā）還對組（zǔ）織起著保護作（zuò）用，也（yě）作為生物體（tǐ）最重要的能量來源之一。由於脂質具有很（hěn）廣泛的作用，因此其（qí）穩（wěn）態也（yě）會隨著機體疾病等發生變化。

1.總膽固醇（Total cholesterol, TC）

血清總膽固醇指血液中各脂蛋白所（suǒ）含膽固（gù）醇總和（hé）。齧齒類（lèi）動物的脂代謝指（zhǐ）標與人（rén）類相比差異明顯。大小鼠體內的大部（bù）分膽（dǎn）固醇都以高密度脂蛋白形式存在，且缺乏膽固醇酯轉運（yùn）蛋白（CETP）。膽固醇濃度的增加多見於動物內分泌、肝髒或腎髒疾病；降低則常（cháng）見於（yú）動物營（yíng）養不良等。

2.甘油三酯（Triglyceride, TG）

甘油（yóu）三酯構成脂肪（fáng）組織，參與TC合成以及血栓（shuān）形成。需要注意的（de）是，小鼠的血脂比較穩定（dìng），對抗高血脂的能力很強，甘油三酯不容易（yì）升高（gāo），尤其C57BL小鼠一般不適合單純用於高甘油三酯血症的造模。TG升高多見於動物過度肥胖、糖尿病等，而營養不良則是導致其（qí）降低的主要因素。

3.高密度脂蛋白（High-density lipoprotein, HDL）

高密度脂蛋白主要由肝髒和小腸（cháng）合（hé）成，含有膽固醇、蛋白質和磷脂，但甘油三酯很少。 與人類和非人靈長類動物不同的是，大鼠體內的HDL濃度高於LDL（低密度脂蛋（dàn）白膽固醇），這可能是由於大鼠體內缺乏膽固醇酯轉運蛋白（CETP）所致。

高密度脂蛋（dàn）白可以清（qīng）除體內膽（dǎn）固醇，當HDL升高時，並非病理表現，無需關注；當動物出現動脈硬化、糖尿病（bìng）、慢性腎（shèn）衰時，HDL表現為降低，且（qiě）老年動物更（gèng）易出現降低情況。

4.低密（mì）度脂蛋白（Low-density lipoprotein, LDL）

低密度脂蛋白由極低密度脂蛋白（bái）轉化而（ér）來，含有豐富的蛋白質、少量的膽固醇和甘油三酯。因（yīn）此，LDL出（chū）現降低的情況（kuàng），提示動物機體血脂不高，可不予關注；但當LDL出現升高時，應該考慮甲狀腺功能低（dī）下、慢性腎衰等，尤其需要關注（zhù）動脈粥樣硬化，LDL是發（fā）生動脈粥樣硬化的重要危險指（zhǐ）標之一。

5.脂蛋白（Lipoprotein, Lip）

齧齒類動物會在肝（gān）髒和小腸中合成（chéng）載脂蛋白（apoB-100和apoB-48），它們是血漿中運輸脂類的重要成分。血（xuè）漿中載脂蛋白水平上升，與（yǔ）糖尿病腎病、尿毒症等相關（guān）；肝髒疾病可使載脂蛋白水平下降。

6.遊離脂肪酸（Nonestesterified Fatty Acid, NEFA）

遊離（lí）脂肪酸在肝髒、脂肪和乳（rǔ）腺組織中合成。當動物（wù）長期使用高脂肪/低碳水化合物的飼料（liào）時，會導致NEFA合成減少；當動物患有伴有脂（zhī）肪酶活性增高的高血（xuè）脂症時，會導致血漿中NEFA增加。

胰腺（xiàn）功能檢（jiǎn）測

胰腺分為兩部分功能，一部分具有（yǒu）外分泌（mì）功能，這部分又（yòu）稱為胰腺腺泡，是胰腺最（zuì）大的組成部分，用來評估胰腺胰泡功能的檢測包括澱粉酶和脂肪酶。另一部分具有內分泌功能，許多檢測都可用來評（píng）估（gū）胰腺的內分泌（mì）功能，如（rú）傳統的（de）血糖監測（cè），以及（jí）果糖胺和糖化血紅蛋白等。

1.澱粉酶（Amylase）

澱粉酶分子（zǐ）量較小，可被腎小球濾過，是尿液中唯一可見的血清酶。澱（diàn）粉酶（méi）雖主要來源於胰腺，但唾液腺和小（xiǎo）腸也可以產生。澱粉（fěn）酶在大鼠和小鼠的唾液腺中（zhōng）的濃度高（gāo）於其他實驗動（dòng）物，因此大小鼠澱粉酶的（de）增高也可以考慮（lǜ）涎腺疾（jí）病。

通常，血澱粉酶（méi）濃度升（shēng）高最常見於急性胰腺（xiàn）炎（yán），此外，慢性（xìng）胰腺炎的複發期和胰管阻塞也可致澱粉酶（méi）升高（gāo）。但是澱粉酶升高的水平與胰腺炎的嚴（yán）重程度沒有直接的比例關係。由於澱粉酶可以經腎（shèn）髒排泄，因此任何原因（yīn）導致腎小球濾過（guò）率降低時，都可引起血清（qīng）澱粉酶升高。

2.脂肪酶（Lipase）

脂肪酶是一組催化長鏈（liàn）脂（zhī）肪酸甘油酯水解的酶（méi）。大多數血清脂肪酶（méi）來源於胰腺，少量來源於胃腸（cháng）道黏膜。過（guò）量的脂肪酶經腎髒濾過，因此（cǐ）在胰腺疾病早期，脂肪（fáng）酶（méi）仍處於正常水平，當病情逐漸加重時（shí），脂肪酶水平才出現升（shēng）高趨勢。

在慢性（xìng）進行（háng）性胰腺疾病中，受損的胰腺細（xì）胞會被結締組織取（qǔ）代，導致（zhì）不能（néng）產生相應的酶，因此澱粉酶和脂肪酶會呈現漸進性降低。脂肪酶活性升高多見（jiàn）於腎髒和肝（gān）髒功（gōng）能異常。此外，服用類固醇藥物可引（yǐn）起脂肪酶升高，但對澱粉（fěn）酶無影響。

糖代謝檢測

1.葡萄糖（Glucose, Glu）

血糖的水平可（kě）以用來評估胰腺功能（néng），其調（diào）節機製比較複雜，除了胰（yí）島素分（fèn）泌（mì）缺乏外，胰高血（xuè）糖素、甲狀腺素、腎上（shàng）腺素和糖皮（pí）質激素都（dōu）可以使（shǐ）血糖升高；葡萄糖降低多見（jiàn）於營養不良、慢性貧血等（děng）。由（yóu）於成熟紅細胞會利用葡萄糖提供（gòng）能量，因此在使用血漿或者（zhě）血清樣本時，應立即將（jiāng）血清或血漿與紅細胞分離，否則在室（shì）溫條件下，紅細胞會使樣本中（zhōng）血（xuè）糖含量每小時下降10%。在檢測葡萄糖（táng）前，應對動物進行禁食，但對於齧齒動物（尤其小鼠（shǔ））來（lái）說，由於它們屬於夜間（jiān）進食（shí）動物（wù），如果進行夜間（jiān）禁食，其（qí）代謝消耗相當於靈長類動物禁食（shí）24-48小時（肝髒糖原基本（běn）耗盡），因此5-6小時禁食更適合小鼠。

2.糖化血紅蛋白（Glycated hemoglobin, GHb）

糖化（huà）血紅蛋白也稱為血（xuè）紅蛋白A1C（HbA1c），是血紅蛋白與葡萄（táo）糖發生不可逆結合反應的產物。當（dāng）機體發生（shēng）高（gāo）血糖時，血紅蛋白（bái）與葡萄糖結（jié）合增加，從而使糖化血紅蛋白升高，因此糖化血（xuè）紅蛋白可以直接反映機體血糖水平。糖化（huà）血紅蛋白反映的是紅細胞壽（shòu）命期間的（de）平均血糖（táng）濃度，大鼠紅細胞壽命（mìng）約60天，小鼠紅細胞（bāo）壽（shòu）命（mìng）約為35-50天。因此和果糖胺相比，糖化血紅蛋白（bái）反（fǎn）映了更長時間內的血糖水平。但需要注意（yì）的是如（rú）果（guǒ）檢測是基於（yú）高效液相層（céng）析法原理，由於溶血（xuè）性貧（pín）血動物的紅細胞壽命短（duǎn），因此會導致糖化（huà）血紅蛋白結果出現假性（xìng）降低。

3.果糖胺（Fructosamine）

果糖胺（àn）是葡（pú）萄糖與蛋白質（尤其白蛋白）發生不可逆結合的產物。果糖胺升（shēng）高表示（shì）動物持（chí）續存在高血糖；但（dàn）動（dòng）物（wù）發生低蛋白血症（zhèng），其血清果糖胺水平會假性降低。

有（yǒu）研（yán）究表明，果糖胺可在臨床研究中，可作為糖尿病動物的血糖監測的（de）有效指標。

其他

在臨床檢測（cè）中，還有一些生化（huà）項不針對任何器官或係統，但可以輔助提供一（yī）些（xiē）診斷信息，如乳酸脫氫酶、肌酸激酶等。

1.肌酸激酶（creatine kinase, CK）

許多組織中都含有肌酸激酶，胃腸道、腎髒、脾髒和（hé）胰腺中含有少量CK，而骨骼肌（jī）、心肌和（hé）大腦中（zhōng）含有大量CK。因此（cǐ）當骨骼肌、心肌受損時，CK會從細胞（bāo）中滲（shèn）出，導（dǎo）致血液中CK含量增加。

由於任何損傷肌細胞膜的物質都可以導致血（xuè）液中CK升高，在實（shí）際檢測時，可對CK同工酶檢（jiǎn）測（cè）來進行區分損傷來源。CK有3中（zhōng）主要同工酶：CK-MB（心（xīn）髒型）、CK-BB（腦型）、CK-MM（骨骼型）。比較特殊（shū）的是，在大鼠血小板中，CK含量是紅細胞的30倍，且目前僅發現存在CK-BB。

另外，肌內注射、手術等導致肌肉損傷（shāng）可引起CK升高；   EDTA、陽光直射或測定不及時可引起（qǐ）樣本中CK假性升高。

2.乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase, LDH）

乳酸脫氫（qīng）酶是一種催化乳酸轉化為丙酮酸的血清酶。LDH一般不具有器官特（tè）異性，它來源廣泛，幾乎所有的組織（zhī）中都含有LDH，但（dàn）是物（wù）種間分布具有差異。如（rú）大鼠骨骼肌中分（fèn）布最多，其（qí）次是心肌（77%）和肝髒（41%）。

LDH的升高雖然多見於（yú）肝髒受損和肌肉損傷，但是它缺乏（fá）評價肝損傷的特異性和敏感性。因此（cǐ）在齧齒動物中，LDH一般多用於檢測實驗性誘導心肌損傷（shāng）。為了（le）提高LDH測定心肌損傷的特異（yì）性，也可以測定其（qí）同工酶（méi），即LDH1和LDH2。

需要注意的是，在常用的（de）實驗動物（wù）中，血小板、紅細（xì）胞、白細胞、肝（gān）髒中都（dōu）可能會表達LDH同工酶（méi），因此肝（gān）損傷、溶血和凝血均會混淆心髒（zāng）損傷的診（zhěn）斷。另外，感染乳酸（suān）脫氫酶增高（gāo）病毒（LDEV）的（de）小鼠，血清中LDH含量可增高3-5倍。

3.C-反應蛋白（C-reactive protein, CRP）

CRP是第一個（gè）在（zài）人（rén）類身上（shàng）發現的急性期反應蛋白（Acute Phase Reaction Proteins，APR），目（mù）前CRP也被認為是（shì）齧齒動物的APR蛋白，肝細胞是合成CRP的（de）主要部位。CRP的主要（yào）生物學功能是（shì）通過於配體（凋（diāo）亡或壞死的細胞，或入侵的細菌、真菌、寄生蟲等的磷酰膽堿）結合，激活補體和單核吞噬（shì）細胞係統，將帶有配體的病原體或（huò）病（bìng）理性細胞清除。在（zài）齧齒（chǐ）動物體內，當炎症或創傷發生後（hòu）6h內，CRP可迅速升高至上千倍，在疾病治愈（yù）後，其含量急速下降。發生心髒病、敗血（xuè）症和腫瘤等多種疾病，CRP都會急劇（jù）上升。

比較特殊的是，健康大鼠體內CRP值較高，且CRP的水平與年（nián）齡相關並呈正比。在健康小鼠和豚鼠血清中，幾乎無法檢出CRP。在這兩種（zhǒng）動物體（tǐ）內，CRP不作為（wéi）急性期蛋白（bái）而發揮作用。特別是豚鼠，在正常狀態和急性期豚（tún）鼠血清中，都無法檢出CRP，這主要是因（yīn）為豚鼠CRP基因中缺乏適當的（de）啟動子區域。